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國內最早研究真菌毒素免疫檢測方法
      
  真菌毒素衛生監控的立法即國家標準的建立由兩方面組成:一是建立真菌毒素檢測方法的國家規范,主要為真菌毒素允許量國家標準的建立和衛生防疫部門的執法、糧油食品和飼料貿易的貨物品質分析以及對引起真菌毒素中毒的污染物進行病因分析提供技術手段。二是建立食品和飼料中真菌毒素的允許量國家標準。這類規范屬于強制性執行的法規,制訂過程中除了依據毒理實驗的結果,還必需進行相當規模的毒素污染調查,以確保所訂指標切合實際,與國家農業生產,食品、飼料供應的接受能力相符。黃曲霉毒素B1允許量國家標準的制訂中就體現出這種矛盾。AFB1強劇毒性、強致癌性物質。單純從毒理學的觀念看待食品中的AFB1檢出即視為有毒,但也只能根據普查的實際情況,暫時依照目前規定的規范執行。
  當然,國外也存在同樣問題。1966年至1975年間,WHO/FA O就連續3次修訂了食品中黃曲霉毒素最高允許量標準,將其從30ppb逐步降低至15ppb歐盟則規定從1998年起進口花生原料中的黃曲霉毒素限量由20μg/kg,花生制品由10μg/kg統一降至4μg/kg即時將對黃曲霉毒素超標的花生入口國自動關閉歐盟15國市場。這兩類有關真菌毒素國家規范的制訂工作中,建立檢測方法的工作進展較快。國從1989年開始進行真菌毒素免疫檢測方法國家規范的研究,至今已建立了黃曲霉毒素B1等7種真菌毒素的免疫檢測方法,其中有些已經正式公布實施,有些在審批過程中,其它重要的真菌毒素也有化學法等檢測手段。國內非臨床檢驗試劑中,真菌毒素的檢測首先引入了單克隆抗體免疫技術。發展還促進了對其它生物毒素的研究,如河豚魚毒素免疫檢測方法的建立。
  但是真菌毒素允許量國家標的制訂仍然滯后。目前只有黃曲霉毒素B1M1脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、展青霉素等少數真菌毒素的允許量規范公布實施。一些真菌毒素雖然已列入規范制訂計劃,但遇到很大困難。有關管理部門對無法直接發生經濟效益的項目資金投入十分有限。而體制改革以后,真菌毒素的污染普查工作中已很難無償組織地方單位共同協作。由于尚有一些規范亟待建立,而且AFB1這樣的非平安性規范也需要適時修訂,所以有關真菌毒素立法的任務十分艱巨。真菌毒素的檢測方法,主要是由各級各類衛生監督部門在執法過程中使用,如果相應的法規不配套,那么已經建立的真菌毒素檢驗方法也就失www.atcc360.com去了用武之地。;以下是國內幾種真菌毒素檢測方法的研究進展:1黃曲霉毒素B1黃曲霉毒素B1二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物。即含有一個雙呋喃環和一個氧雜萘鄰酮(香豆素)前者為基本毒性結構,后者與致癌有關。
  國內最早研究真菌毒素免疫檢測方法的中國醫學科學院腫瘤研究所的孫宗棠,于1983年建立了AFB1單克隆抗體放射免疫測定方法。1992年,中國科學院上海細胞所李永鏞和上海醫科大學公共衛生學院殷芬、俞順章等人合作建立了AFB1單克隆抗體的酶聯免疫檢測方法。中國預防醫科院營養與食品衛生研究所和江蘇微生物所也先后建立了AFB1多克隆抗體的酶聯免疫測定方法。北京市營養源研究所路戈與中國醫科院腫瘤研究所王德斌和衛生部食品衛生監督檢驗所計融等人合作于1994年建立了規范的AFB1單克隆抗體酶聯免疫檢測方法,該法已列為國家規范(GB/T5009.2219961985年以前,另有幾種熒光色譜法列為國家規范(GB/T5009.231996;GB/T5009.241996其中薄層色譜法由衛生研究所和青島商品檢驗局于1973年建立(GB/T5009.2219962T2毒素為劇毒(豬靜注LD50=1.2mg/kg,具有明顯的細胞毒,而且是體內蛋白質合成的抑制劑,有致畸性和致突變性。中毒后嘔吐,腹瀉,嚴重時損傷造血組織。
  T2毒素的免疫檢測方法由衛生部食檢所陽傳和、羅雪云、計融于1991年建立(GB/T1493394方法最低檢出量為1ng/ml敏感范圍為41000ng/ml這是首次采用免疫技術建立的檢測真菌毒素的國家規范。3脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素,DON較早(1970年)被分離提純后命名的真菌毒素,毒性弱于T2毒素,小鼠經口LD50=9.2mg/kg中毒癥狀類似,有明顯的致吐作用。DON經對甲基苯甲醛噴霧后呈黃色,衛生部食檢所魏潤蘊于1986年建立了DON薄層層析檢測方法(GB/T14929.51994DON免疫檢測方法由衛生部食檢所陽傳和、計融于1992年建立,方法最低檢出量為5ng/ml敏感范圍為51000ng/ml該法已批準為國家標準(GB/T14929.51994小麥、面粉、玉米及玉米粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇限量規范已于1996年9月1日頒布實施(GB163291996最高允許量為1000μg/kg4二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇(DA S毒性強于T2毒素(豬靜注LD50=0.367mg/kg1992年,衛生部食檢所李業鵬、羅雪云等用酶標志單克隆抗體建立了檢測DA S雙抗夾心酶免疫斑點檢驗方法,最低檢出量為10ng/ml敏感范圍為21000ng/ml5玉米赤霉烯酮(ZENF2另外一種從赤霉病麥中分離出來的真菌毒素(化學名稱為610羥基-6氧基碳烯基)β-雷鎖酸-μ-內酯,分子量為318主要污染小麥、大米、玉米、蕎麥等谷物,一種生殖系統毒素,有強烈致畸作用。
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