細胞線粒體分離試劑盒
細胞線粒體分離試劑盒(Cell Mitochondria Isolation Kit)是用于快速便捷分離培養細胞線粒體的試劑盒。
本試劑盒在分離線粒體的同時可以獲得去除線粒體的細胞漿蛋白，可用于研究細胞色素c等線粒體蛋白向胞漿的釋放。
使用本試劑盒分離獲得的線粒體純度較高，并且絕大部分分離獲得的線粒體都含有完整的內膜和外膜，并具有線粒體的生理功能。因此本試劑盒分離得到的線粒體可以用于線粒體的生理功能等方面的研究。例如可以使用北京萊耀的C2006 線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)測定分離得到的線粒體的膜電位。
本試劑盒分離得到的線粒體也可以被試劑盒中的線粒體裂解液或其它適當裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、雙向電泳等蛋白分析。
本試劑盒提供了線粒體制備過程中勻漿程度的重要判斷指標，即臺盼藍染色，使分離得到的線粒體的質量更加有保證。臺盼藍染色液為選用試劑，在實驗條件成熟后可以不必使用。
本試劑盒提供了蛋白酶抑制劑PMSF，使勻漿時蛋白酶的活性被適當抑制，這樣在獲得線粒體的同時還可以獲得有時有用的去除了大量線粒體的蛋白，在進行蛋白或酶活分析時可以作為對照。
如果每個樣品的細胞數量為2000-5000萬，本試劑盒可以處理50-100個樣品。
保存條件：
-20℃保存，一年有效。其中臺盼藍染色液也可以4℃保存，PMSF(晶體)和PMSF(溶劑)在配制成100mM PMSF溶液前可以室溫保存。
注意事項：
如果不是用于制備線粒體蛋白樣品，線粒體分離試劑和線粒體裂解液中不必加入PMSF。
如果用于制備線粒體蛋白樣品，線粒體分離試劑和線粒體裂解液中需添加PMSF。PMSF一定要在線粒體分離試劑或線粒體裂解液加入到樣品中前2-3分鐘內加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
分離線粒體的所有步驟均需在冰上或4℃進行，所用溶液需冰浴或4℃預冷。
通常在分離線粒體時前后兩次離心速度選取600g和11,000g，如果希望純度更高，但對線粒體的得率要求不高，前后兩次離心速度可以采用1000g和3500g。
臺盼藍與PMSF對人體有毒，請注意小心防護。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
